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artículo
Publicado 2019
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El yacón es una planta asterácea originaria de los Andes que en los últimos años ha recibido especial atención por sus propiedades nutricionales y farmacológicas. Sus raíces almacenan fructanos de tipo inulina con bajo grado de polimerización, también llamados fructooligosacáridos (FOS). La pérdida de los FOS en las estructuras reservantes con la consecuente disminución de sus propiedades funcionales están relacionadas directamente con la actividad de la enzima fructanoexohidrolasa (FEH). Las plantas de yacón fueron obtenidas de la estación experimental “Baños del Inca” perteneciente al Instituto Nacional de Innovación Agraria (INIA). Examinando cuatro métodos de extracción de RNA total a partir de las raíces reservantes, se obtuvo un mejor rendimiento y calidad con el método CTAB modificado. El juego de cebadores diseñados y la técnica de RT-PCR generaron frag...
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artículo
Publicado 2019
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El yacón es una planta asterácea originaria de los Andes que en los últimos años ha recibido especial atención por sus propiedades nutricionales y farmacológicas. Sus raíces almacenan fructanos de tipo inulina con bajo grado de polimerización, también llamados fructooligosacáridos (FOS). La pérdida de los FOS en las estructuras reservantes con la consecuente disminución de sus propiedades funcionales están relacionadas directamente con la actividad de la enzima fructanoexohidrolasa (FEH). Las plantas de yacón fueron obtenidas de la estación experimental “Baños del Inca” perteneciente al Instituto Nacional de Innovación Agraria (INIA). Examinando cuatro métodos de extracción de RNA total a partir de las raíces reservantes, se obtuvo un mejor rendimiento y calidad con el método CTAB modificado. El juego de cebadores diseñados y la técnica de RT-PCR generaron frag...
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tesis doctoral
Publicado 2024
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Universidad Nacional Agraria La Molina. Escuela de Posgrado. Doctorado en Ciencias e Ingeniería Biológicas
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artículo
Publicado 2019
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El yacón es una planta asterácea originaria de los Andes que en los últimos años ha recibido especial atención por sus propiedades nutricionales y farmacológicas. Sus raíces almacenan fructanos de tipo inulina con bajo grado de polimerización, también llamados fructooligosacáridos (FOS). La pérdida de los FOS en las estructuras reservantes con la consecuente disminución de sus propiedades funcionales están relacionadas directamente con la actividad de la enzima fructanoexohidrolasa (FEH). Las plantas de yacón fueron obtenidas de la estación experimental “Baños del Inca” perteneciente al Instituto Nacional de Innovación Agraria (INIA). Examinando cuatro métodos de extracción de RNA total a partir de las raíces reservantes, se obtuvo un mejor rendimiento y calidad con el método CTAB modificado. El juego de cebadores diseñados y la técnica de RT-PCR generaron frag...
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tesis de maestría
Publicado 2023
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Determina el impacto de los factores tafonómicos (ácido, alcalino, húmedo/fúngico) en el ADN extraído de muestras óseas antiguas, para comparar tres métodos de extracción y evaluar la eficacia y rendimiento de esta molécula en la investigación. Las metodologías de extracción de la molécula de ADN, a partir de muestras óseas, se rigen con el empleo de técnicas complejas, que con frecuencia tienen que lidiar a diario con serios problemas como el que la muestra se encuentre degradada, la ausencia o escasa cantidad de ADN; así como la presencia de inhibidores que pueden ser extraídos conjuntamente con el ADN. La investigación se realizó para comparar la eficacia de tres procedimientos de extracción de ADN, que a su vez resulten amplificables mediante la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR por sus siglas en inglés) a partir de restos óseos antiguos. De ...
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tesis de grado
Publicado 2009
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Esta Tesis fue posible gracias al Financiamiento del Consejo Nacional de Ciencia Tecnología e Innovación Tecnológica (CONCYTEC). Esta institución apostó en mi y otros compañeros de la maestría dándonos la oportunidad de una Beca que me permitió desarrollar y concluir mis estudios y publicar la Tesis para la obtención del Grado de Magister Scientiae. Asimismo, quisiera expresar un especial agradecimiento a la Srta. Erika Saavedra, del FONDECYT, quien con su paciencia y predisposición pude lograr terminar esta Tesis.
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tesis de grado
Publicado 2009
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Los programas de mejoramiento genético requieren de herramientas versátiles y de bajo costo que permitan lograr en menor tiempo nuevas variedades. En el caso del cacao, se disponen de una serie de técnicas moleculares que facilitan el trabajo al fitomejorador. Sin embargo, la utilidad y conveniencia de tales, serán elegibles dependiendo de las condiciones y objetivos del trabajo. Por este motivo, se trazaron los objetivos de ensayar los marcadores ISSR, determinar su poder discriminante y determinar parámetros de diversidad genética en una colección de cacao de Tingo María. Ésta consistió en 50 individuos o accesiones, de diversas procedencias genéticas y geográficas. El ISSR es una técnica basada en PCR que amplifica el fragmento entre dos secuencias de microsatélites, utilizando un iniciador complementario a éstos. Las muestras fueron colectadas en la provincia de Leonci...
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tesis de maestría
Publicado 2019
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La fascioliasis es una enfermedad parasitaria del hígado y de las vías biliares de animales y humanos, y es considerada un problema de Salud Pública por su alta prevalencia como infección humana, especialmente en niños, y un problema veterinario con un importante impacto económico. El objetivo del presente estudio fue comparar la conformación molecular nucleotídica de la enzima Glutation S Transferasa (GST) en cepas de Fasciola hepatica resistentes al Triclabendazol (TCBZ). Para ello, se obtuvo ADN complementario mediante la técnica molecular RT-PCR, a partir del ARN mensajero extraído de fasciolas adultas resistentes al TCBZ, 06 provenientes de ovinos infectados experimentalmente con cepa bovina resistente al TCBZ y 06 de infección humana resistente, obtenidos mediante infección experimental en ovinos. Todos los especímenes fueron provistos por el Laboratorio de Inmunologí...
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artículo
Publicado 2017
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The aim of this study was to determine and compare the expression levels of IgA genes and associated cytokines IL-5, IL-6 and TGF-β in the intestinal mucosa of clinically healthy baby alpaca, that were orally vaccinated with a clostridial antigen. Ten unvaccinated baby alpacas (control) and 15 vaccinated (two doses with a seven-day interval) were used. Sampling was done seven days after the second dose. Likewise, two age subgroups (15-28 and 35-56 days of age at the time of sampling) were considered. Intestinal segments of 2 cm in length were taken from the middle portion of the jejunum and stored at -196 °C. Total RNA extraction was performed and the complementary DNA (cDNA) was synthesized by reverse transcription. Subsequently, real-time PCR was run using specific primers for IL-5, IL-6, TGF-β and exon 3 of IgA. Relative expression evaluation was performed using the 2-ΔΔÄCt meth...
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artículo
Publicado 2017
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The aim of this study was to determine and compare the expression levels of IgA genes and associated cytokines IL-5, IL-6 and TGF-β in the intestinal mucosa of clinically healthy baby alpaca, that were orally vaccinated with a clostridial antigen. Ten unvaccinated baby alpacas (control) and 15 vaccinated (two doses with a seven-day interval) were used. Sampling was done seven days after the second dose. Likewise, two age subgroups (15-28 and 35-56 days of age at the time of sampling) were considered. Intestinal segments of 2 cm in length were taken from the middle portion of the jejunum and stored at -196 °C. Total RNA extraction was performed and the complementary DNA (cDNA) was synthesized by reverse transcription. Subsequently, real-time PCR was run using specific primers for IL-5, IL-6, TGF-β and exon 3 of IgA. Relative expression evaluation was performed using the 2-ΔΔÄCt meth...
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artículo
Publicado 2011
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Se estandarizó y validó la técnica de Transcriptasa Reversa - Reacción en Cadena de la Polimerasa (RT-T-PCR) en tiempo real para el diagnóstico de la Peste Porcina Clásica (PPC). Se utilizó extractos de tonsilas y nódulos linfáticos de porcinos positivos (n=36) y negativos (n=30) a PPC mediante inmunofluorescencia (IF). La extracción de ARN viral, síntesis del ADN complementario y PCR en tiempo real se realizaron utilizando kits comerciales. Se utilizaron tres pares de cebadores para amplificar una región conservada (5’UTR) del virus PPC (VPPC) y del panpestivirus (virus de la DVB y EF) y una región codificante de la proteína E2 del VPPC frente a cepas de referencia del VPPC Alfort/187, Brescia y cepa China vacunal como controles positivos y cepas de los virus diarrea viral bovina, enfermedad de la frontera y rotavirus porcino como controles negativos. El 83.3 ± 12.3% (3...
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artículo
Publicado 2011
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A real time RT-PCR assay was standardized and validated for detection of classical swine fever virus (CSFV). Tonsil tissue and lymph nodules that were positive (n=36) and negative (n= 30) to CSFV by immunofluorescence test (IF) were selected. The viral RNA extraction, the complementary DNA (cDNA) synthesis and real time RT- PCR were performed using commercial kits. Three sets of primers were tested for amplification of a conserved region (5’UTR) of panpestivirus and 5’UTR Chinese strain and the E2 glycoprotein region (E2 PPC) against reference strains of CSFV: Alfort/187, Brescia, and a vaccine Chinese strain as positive controls, and strains of the bovine viral diarrhea virus, border disease virus and porcine rotavirus as negative controls. The 83.3 ± 12.3% (30/36) of positive simples to CSFV by IF test was positive for virus isolation and the 96.7 ± 3.3% (29/30) of negative sampl...
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tesis de grado
Publicado 2024
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La crianza familiar-comercial de cuyes (Cavia porcellus) es una actividad socio-económica importante para las familias rurales; por lo que un problema sanitario puede generar un impacto importante en su crianza. El presente estudio buscó detectar la presencia del virus de parainfluenza tipo 3 (PIV-3) a través de RT-PCR usando muestras de hisopados traqueales de cuyes en etapa de recría y reproductores de sistemas productivos familiar-comercial en la provincia de Cajabamba, departamento Cajamarca, 2023. Se aplicó el tipo de muestreo por conveniencia, abarcando 63 individuos como muestra considerando animales con signología respiratoria, como estornudos y mucosidad perinasal, o con antecedente y/o sospecha de presentación o enfermedad respiratoria transitoria. Los individuos pasaron por la etapa de faenamiento en el cual se realizó la contención física, aturdimiento e insensibili...
14
artículo
Publicado 2019
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La investigación tuvo como objetivo incluir el uso de medios audiovisuales en la comprensión de textos descriptivos del idioma ingles en los estudiantes del Instituto de Idiomas y Lingüística de la Universidad San Pedro Chimbote año 2018. La investigación es de tipo cuasi experimental, la población fue de 60 estudiantes, con una muestra de 40 estudiantes, la técnica de muestreo que se utilizó fue el no probabilístico-intencional, se utilizaron técnicas de pruebas (pretest y postest). Los resultados obtenidos posterior al procesamiento y análisis de datos, indican que existen diferencias significativas en el grupo control y experimental después del uso de los medios audiovisuales. Las dificultades que se presentó determinaron no haber encontrado herramientas tecnológicas como apoyo en el desarrollo del proceso de aprendizaje, concluyendo que resulta necesario el uso de medi...
15
artículo
Publicado 2014
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El presente estudio tuvo como objetivo determinar y comparar los niveles de expresión relativa de ARN mensajero (ARNm) de IgA en el epitelio intestinal de las crías de alpacas en aparente buen estado de salud (n=35) o enfermas con enteropatía (n=35). Encada grupo se incluyeron cinco animales recién nacidos antes del consumo de calostro y cinco por cada semana de edad hasta la sexta semana. Se tomaron 2 cm de yeyuno por animal y se almacenaron en congelación a -196 °C. Se realizó la extracción de ARN total con Trizol® y luego se sintetizó el ADN complementario (ADNc). Posteriormente se realizó el PCR y la RT-PCR Tiempo Real empleando oligonucleótidos diseñados para la detección del exón 1 de la región Fc IgA de alpaca. Se realizó la cuantificación de la expresión relativa mediante normalización con ARNm del gen GAPDH y los cálculos de la expresión relativa se realiza...
16
tesis de grado
Publicado 2012
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El presente estudio tuvo como objetivos determinar y comparar los niveles de expresión relativa de ARN mensajero (ARNm) de IgA en el epitelio intestinal de las crías de alpacas sanas y enfermas con enteropatía hasta los 45 días de edad. Se muestrearon 70 animales: 35 sanas y 35 enfermas; 5 crías antes del consumo de calostro y 5 por cada semana de edad hasta la sexta semana. Las muestras consistieron en 2 cm de longitud del yeyuno, la cual fue inmediatamente conservada en nitrógeno líquido (-196°C). Se realizó la extracción de ARN total con Trizol®, luego se sintetizó ADN complementario (ADNc). Posteriormente se realizó la PCR convencional y la RT- PCR Tiempo Real empleando oligonucleótidos diseñados para la detección del exón 1 de de la región Fc IgA de alpaca. Se realizó la cuantificación de la expresión relativa mediante normalización con ARNm del gen GAPDH y los...
17
tesis doctoral
Publicado 2016
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La fascioliasis humana y animal causa pérdidas económicas millonarias en el mundo, esto se agrava con la resistencia del parásito al triclabendazol (TCBZ). A nivel molecular, diferentes proteínas de Fasciola hepatica se estudian en relación con la resistencia al TCBZ y en relación a su empleo como vacunas para una respuesta protectora en el hospedero definitivo. Entre estas proteínas están las saposinas (FhSAP1 y FhSAP2), cuyas diferencias moleculares tendrían relación con la resistencia al TCBZ o por el contrario, la falta de variabilidad favorecería su uso en diferentes áreas geográficas. El presente estudio tuvo por finalidad determinar la constitución nucleotídica de algunos segmentos de las secuencias de FhSAP1 y FhSAP2 en cepas de F. hepatica de distinta sensibilidad al TCBZ y procedentes de dos áreas geográficas diferentes. Para ello, se obtuvo ADN complementario ...
18
artículo
Publicado 2017
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El objetivo de este estudio fue determinar la expresión de genes del receptor TCRγδ (gamma y delta) en el epitelio yeyunal de 16 crías de alpaca aparentemente sanas, de 2 a 47 días de edad, mediante la cuantificación de ARN mensajero (ARNm) utilizando cebadores específicos. Se tomaron porciones de yeyuno (2 cm de longitud). El ARNm total de la mucosa de la porción media del yeyuno actuó como molde para la síntesis de ADN complementario mediante transcripción reversa (RT), seguida de un PCR-tiempo real para la amplificación y cuantificación de los ARNm de los polipéptidos que conforman las cadenas gamma y delta del TCR. Se utilizó el método 2-ΔΔCt para la cuantificación relativa de ARNm, teniendo como calibrador a dos crías neonatas que no habían consumido calostro. Las crías de 1, 2, 3 y ≥4 semanas de edad expresaron el gen gamma en 4.75, 6.78, 16.24 y 103.11 vece...
19
tesis de grado
Publicado 2023
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Objetivo: Identificar molecularmente los virus ARN que afectan a cultivares de tomate en la costa del Perú. Materiales y métodos: Se recogieron hojas de plantaciones de tomate que presentaron sintomatología por infección viral, las hojas colectadas se les realizó una molienda con nitrógeno líquido para lograr extraer el ARN utilizando un kit comercial y se le realizó una digestión con la enzima DNAsa para tener una muestra pura de ARN sin rasgos de ADN. Se realizó para sintetizar el ADN complementario, luego de se empleó una PCR, determinando sus condiciones óptimas de amplificación, los resultados se observaron en una electroforesis en gel de agarosa, las muestras que fueron positivas para los patógenos por PCR, se enviaron a secuenciar al extranjero. Las muestras de los virus secuenciados se alinearon con otras secuencias de virus reportados, que se descargaron del GenBan...
20
tesis doctoral
Publicado 2016
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La fascioliasis humana y animal causa pérdidas económicas millonarias en el mundo, esto se agrava con la resistencia del parásito al triclabendazol (TCBZ). A nivel molecular, diferentes proteínas de Fasciola hepatica se estudian en relación con la resistencia al TCBZ y en relación a su empleo como vacunas para una respuesta protectora en el hospedero definitivo. Entre estas proteínas están las saposinas (FhSAP1 y FhSAP2), cuyas diferencias moleculares tendrían relación con la resistencia al TCBZ o por el contrario, la falta de variabilidad favorecería su uso en diferentes áreas geográficas. El presente estudio tuvo por finalidad determinar la constitución nucleotídica de algunos segmentos de las secuencias de FhSAP1 y FhSAP2 en cepas de F. hepatica de distinta sensibilidad al TCBZ y procedentes de dos áreas geográficas diferentes. Para ello, se obtuvo ADN complementario ...
