En el Perú es cada vez más frecuente que investigaciones realizadas en laboratorios de universidades públicas y privadas impliquen el uso de técnicas de biología molecular relacionadas con el clonamiento y expresión de genes en sistemas heterólogos con la finalidad de contribuir al conocimiento biomédico o industrial. El microorganismo de elección usado en la mayoría de estos casos es la bacteria Escherichia coli debido a la relativa sencillez tecnológica y procedimental, aunque sus alcances sean limitados en comparación con organismos más complejos que requieren un control más exacto de los parámetros fisicoquímicos y de suministro de los sustratos, como es el caso de la levadura Pichia pastoris o líneas celulares de mamíferos o insectos. Si bien existen biorreactores comerciales de alta eficacia y capaces de sustentar una diversidad de bioprocesos, su costo en la actu...

Objective: Adapt the microneutralization test (MNT) to detect neutralizing antibodies against dengue serotype 2 virus (DENV-2) in the Vero-76 cell line.  Materials and methods. Different cellular concentrations (0.6 x 105 cell / mL, 0.9 x 105 cell / mL, 1.2 x 105 cell / mL) and percentages of fetal bovine serum (FBS) at 2%, 3% and 4%, passages number of virus stock and incubation days were evaluated. The viral seed was confirmed by RT-qPCR. DENV-2 was propagated by carrying out 5 successive passages in the Vero-76 cell line, then the virus was titrated in microplates and 2 methods were evaluated: complete monolayer and cell suspension, and the optimal coloring day was determined.  Obtained the results, it was evaluated by the MNT for DENV-2: 5 sera negative to DENV-2 and YFV, 5 sera negative to DENV-2 and seropositive to YFV and 5 seropositive sera to DENV-2 confirmed by plaque...

Objetivo: Estandarizar la prueba de microneutralización (MNT) para detección de anticuerpos neutralizantes contra el virus dengue serotipo 2 (DENV-2) en la línea celular Vero-76.  Materiales y métodos: Se evaluaron diferentes concentraciones celulares (0,6 x105 cel/mL, 0,9 x105 cel/mL, 1,2 x105 cel/mL), porcentajes de 2%, 3% y 4% de suero bovino fetal (SBF), número de pasajes del stock de virus y los días de incubación. La semilla viral se confirmó por RT-qPCR. El DENV-2 se propagó realizando 5 pasajes en células Vero-76, seguidamente se tituló el virus en placas de 96 pozos y se evaluaron 2 métodos de infección celular: monocapa y células en suspensión, además se determinó el día óptimo de coloración de las células. Obtenidos los resultados, se procesaron mediante MNT para DENV-2 las siguientes muestras: 5 sueros negativos a DENV-2 y YFV, 5 sueros negativos a D...