Purificación del dominio N-terminal del Factor de Iniciación 3 de Escherichia coli para la selección de Aptámeros

• Autor: Loayza Guzmán, Mariana
• Formato: tesis de grado
• Fecha de Publicación: 2018
• Institución: Universidad Peruana de Ciencias Aplicadas
• Repositorio: UPC-Institucional
• Lenguaje: español
• OAI Identifier: oai:repositorioacademico.upc.edu.pe:10757/622962
• Enlace del recurso: http://hdl.handle.net/10757/622962
• Nivel de acceso: acceso abierto
• Materia: Biosíntesis de proteínas; Factor 3 procariótico de iniciación; Antibacteriano; Aptámeros de péptidos

El presente estudio se centra en la fase de iniciación de la síntesis de proteínas, la generación de aptámeros como candidatos para reducir la función fisiológica del factor de iniciación 3 (IF-3). Mediante técnicas de biología molecular se verificó la correcta clonación de IF-3 NTD en el plásmido pET24a. Este se utilizó para transformar la bacteria modelo Escherichia coli BL21 y así poder inducir la producción masiva del dominio de IF-3. Mediante técnicas cromatografías de afinidad se aisló el dominio N terminal del factor de iniciación IF-3, obteniendo altos grados de pureza y rendimiento de producción. El dominio N purificado se utilizó en la técnica SELEX (del inglés, Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment) para generar aptámeros. Se encontraron cinco moléculas con potencial de unión al dominio N de IF-3. La presente investigación brinda las bases para estudiar la interacción del dominio N del factor IF-3 con los aptámeros en sistemas libre de células y así evaluar su potencial inhibidor. Se espera que dichas moléculas se comporten como potenciales nuevos fármacos, así contribuyendo para combatir la necesidad de nuevos antibióticos.