Inserción del gen RB en las variedades Revolución y Désirée de Solanum tuberosum para conferir resistencia a Phytophthora infestans

• Autor: Serna Chumbes, Manuel Fernando
• Formato: tesis de grado
• Fecha de Publicación: 2011
• Institución: Universidad Ricardo Palma
• Repositorio: URP-Tesis
• Lenguaje: español
• OAI Identifier: oai:repositorio.urp.edu.pe:20.500.14138/1716
• Enlace del recurso: https://hdl.handle.net/20.500.14138/1716
• Nivel de acceso: acceso abierto
• Materia: Papas (Tubérculos) -- Genética; Papas (Tubérculos) -- Enfermedades y plagas; https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.00

Con el fin de introducir el gen RB que confiere resistencia al tizón tardío se desarrollaron dos construcciones genéticas, la primera sólo con el gen de interés (RB) y la segunda con el gen de interés y un gen de resistencia a kanamicina, que sirvió como marcador de selección. Ambas construcciones fueron usadas para transformar mediante Agrobacterium tumefaciens, explantes de Solanum tuberosum de las variedades Revolución y Désirée Se desarrollaron medios para propagación y regeneración de las plántulas de Revolución, y se determinó la concentración de antibiótico necesaria para la selección de los explantes transformados y la eliminación de Agrobacterium. Se realizaron los eventos de transformación con la primera construcción carente del gen marcador de selección; por lo cual, la mayoría de los explantes regeneraron. Los regenerantes fueron analizados por PCR y se obtuvieron 7 líneas posiblemente transgénicas, pero en los resultados con Southern blot resultaron negativas. De la transformación con la segunda construcción, en la variedad Désirée se obtuvieron 12 plantas putativamente transgénicas que fueron luego analizadas por Southern blot confirmando que 10 de ellas eran transgénicas y contenían el gen de interés