Estandarización de un método de enrequecimiento de ADN genómico de Plasmodium Falciparum

• Autor: Mavila Soria, Andry Mercedes
• Formato: tesis de grado
• Fecha de Publicación: 2019
• Institución: Universidad Nacional De La Amazonía Peruana
• Repositorio: UNAPIquitos-Institucional
• Lenguaje: español
• OAI Identifier: oai:repositorio.unapiquitos.edu.pe:20.500.12737/6811
• Enlace del recurso: http://repositorio.unapiquitos.edu.pe/handle/20.500.12737/6811
• Nivel de acceso: acceso abierto
• Materia: ADN; Plasmodium falciparum; Métodos; Estandarización; Malaria; Biología Celular; http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.01

Malaria en el Perú es una enfermedad endémica, que constituye un problema de salud pública, principalmente en el departamento de Loreto, el cual concentra altas proporciones de infecciones asintomáticas y submicroscópicas. El objetivo de este trabajo fue estandarizar un método de enriquecimiento de ADN genómico de P. falciparum. Muestras de ADN de P. falciparum de diferentes concentraciones parasitarias fueron enriquecidas a través del método de amplificación selectiva del genoma total (SWGA), utilizando la polimerasa phi29 y los conjuntos de cebadores 6A y 8A previamente reportados. Mediante SWGA se logró incrementar hasta ~ 126 veces (> 5 000 moléculas/μL) el ADN inicial de P. falciparum en muestras clínicas simuladas. El uso de la enzima de restricción FspEI generó un incremento de ~ 38 veces el ADN de P. falciparum y la eliminación total de ADN humano. Se logró incrementar hasta ~ 29 126 veces (> 60 000 moléculas/μL) el ADN inicial de P. falciparum en muestras clínicas de pacientes con malaria. En conclusión, el método SWGA produce el enriquecimiento del ADN de P. falciparum en una amplia gama de concentraciones, a partir de muestras clínicas simuladas y muestras clínicas de pacientes. Finalmente, este trabajo proporciona una herramienta útil a los grupos de investigación de Malaria en la región Loreto, y es elemento importante para realizar diferentes estudios que involucren el ADN de muestras de baja densidad parasitaria.