Caracterización molecular mediante RAPD de CEPAS de Leishamania aisladas de pacientes de la Microred de Kiteni

• Autor: Pérez Vélez, Erika Sofía
• Formato: tesis de grado
• Fecha de Publicación: 2011
• Institución: Universidad Nacional de San Antonio Abad del Cusco
• Repositorio: UNSAAC-Institucional
• Lenguaje: español
• OAI Identifier: oai:repositorio.unsaac.edu.pe:20.500.12918/1082
• Enlace del recurso: http://hdl.handle.net/20.500.12918/1082
• Nivel de acceso: acceso abierto
• Materia: Caracterización molecular; Cepas de Leishmania; Leishmania; Técnica RAPD; http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.01

Mediante la técnica de Amplificación al azar de fragmentos polimórficos (RAPD), utilizando el cebador OPC-20, se logró diferenciar los aislamientos provenientes de pacientes de la Microred de Salud de Kiteni, se aislaron 48 cepas de Leishmania a partir de lesiones cutáneas y/o mucosas. Se estandarizó la técnica a las condiciones del Laboratorio de Inmunología de la Facultad de Ciencias Biológicas de la UNSAAC; para lo cual se utilizó el DNA de cepas de referencia correspondiente a Leishmania (V.) braziliensis, Leishmania (V.) peruviana, Leishmania (V.) guyanensis, y Leishmania (V.) lainsoni; los productos de amplificación se revelaron mediante el uso de geles de agarosa al 1.5%. Con ayuda del documentador de geles y el software Quantity One, se procedió a determinar el tamaño molecular de los productos de amplificación de cada una de las cepas problema y los patrones utilizados. Para realizar la evaluación cuantitativa, se procedió a construir una matriz básica de datos teniendo en cuenta la presencia (1) y ausencia (O) de los productos de amplificación; utilizando el software Past se procedió a hallar el índice de similitud utilizando el índice de Jaccard, es así que se encontraron: 18 cepas cuyos índices de similaridad se encuentran entre 0.6 y 1.0 que corresponden a Leishmania (V.) braziliensis, 3 cepas cuyos índices de similaridad están entre 0.5 y 0.8 que corresponde a Leishmania (V.) guyanensis, 2 cepas cuyos índice de similaridad es 1.0 que corresponde a Leishmania (V.) lainsoni y 25 cepas cuyos índices de similaridad no se asemejaron a ningún patrón usado en el estudio y se señalan como Leishmania spp.