Efecto inhibitorio del péptido melitina sobre la actividad hidrolítica de β-lactamasas de espectro extendido de Escherichia coli

• Autores: Ramos Alcantara, Sheril Ingrid, Cornejo Napan, Maria Alejandra
• Formato: tesis de grado
• Fecha de Publicación: 2024
• Institución: Universidad Peruana Cayetano Heredia
• Repositorio: UPCH-Institucional
• Lenguaje: español
• OAI Identifier: oai:repositorio.upch.edu.pe:20.500.12866/16277
• Enlace del recurso: https://hdl.handle.net/20.500.12866/16277
• Nivel de acceso: acceso abierto
• Materia: β-Lactamasas de Espectro Extendido; Melitina; Actividad Enzimática; Péptidos Antimicrobianos; http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.01; http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03; http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#2.06.02

Antecedentes: Las enzimas β-lactamasas de Espectro Extendido (BLEE) son el mecanismo de resistencia antimicrobiana más diseminado a nivel global. Existe poca atención sobre la prevención de la síntesis de β-lactamasas, que se puede lograr empleando compuestos de diversa naturaleza, entre ellos, los péptidos antimicrobianos. Melitina es un péptido antimicrobiano aislado del veneno de abeja o Apitoxina y ha demostrado tener efecto regulador intracelular sobre la síntesis de macromoléculas en bacterias. Objetivo: Evaluar la actividad hidrolítica de enzimas BLEE tipo CTX-M de Escherichia coli post exposición a concentraciones sub inhibitorias de Melitina purificada. Materiales y métodos: La purificación y caracterización de Melitina se realizó a partir de cristales de Apitoxina cruda. Se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria de Melitina (MIC, por sus siglas en inglés) sobre cepas de E. coli BLEE tipo CTX-M. Las bacterias fueron tratadas con dosis sub inhibitorias de 0,5xMIC y 0,25xMIC de Melitina. Finalmente, se cuantificó la actividad enzimática de β-lactamasas mediante un ensayo cinético con nitrocefina. Resultados: La fracción Api<10kDa presentó una única banda proteica (2,8 kDa) correspondiente a Melitina purificada. La MIC promedio de Melitina frente a las cepas de estudio E. coli BLEE tipo CTX-M fue 60 μg/ml. La dosis sub inhibitoria 0,5xMIC de Melitina redujo hasta un 67% la actividad enzimática de BLEE comparado a cepas no expuestas (p<0.002). Conclusiones: Melitina a concentraciones sub inhibitorias inhibió la actividad hidrolítica de enzimas BLEE tipo CTX-M de E. coli y puede considerarse como una alternativa para futuras drogas contra bacterias productoras de BLEE.