Caracterización de antígeno circulante de taenia solium detectado por anticuerpos monoclonales acoplados a partículas magnéticas en el diagnóstico de neurocisticercosis humana

• Autor: Toribio Salazar, Luz Milagros
• Formato: tesis de grado
• Fecha de Publicación: 2019
• Institución: Universidad Nacional Federico Villarreal
• Repositorio: UNFV-Institucional
• Lenguaje: español
• OAI Identifier: oai:repositorio.unfv.edu.pe:20.500.13084/5109
• Enlace del recurso: https://hdl.handle.net/20.500.13084/5109
• Nivel de acceso: acceso abierto
• Materia: Neurocisticercosis; Antígeno circulante; Anticuerpos monoclonales; https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.00.00

El diagnóstico inmunológico de neurocisticercosis (NCC) tiene limitaciones como la dificultad para obtener la muestra y no distinguir una infección pasada de una actual. El diagnóstico basado en antígenos purificados ha mejorado notablemente la especificidad y sensibilidad; por ello se han estudiado nuevos métodos de purificación. El grupo de trabajo de cisticercosis de Perú diseñó anticuerpos monoclonales (mAbs) específicos contra quistes de Taenia solium, sin embargo, el antígeno que reconocen es desconocido. En este estudio, se realizó la caracterización de este antígeno circulante en orina mediante el uso de partículas magnéticas acopladas a mAbs. Se realizó un ELISA basado en partículas magnéticas con muestras de orina para comprobar la capacidad de captura de las partículas. Para purificar el antígeno capturado, se compararon métodos de elución denaturantes y no denaturantes y fueron visualizados mediante ELISA directo, SDS-PAGE y Western Blot. Finalmente se realizó la espectrometría de masas (MS) del eluido. En el ELISA basado partículas magnéticas, se obtuvieron valores de OD≥3.8 demostrando la alta capacidad de los mAbs para capturar antígeno en orina. Al comparar los métodos de elución, el buffer no denaturante glicina permitió obtener bandas definidas entre 37-25 kDa; la MS identificó a dos proteínas: actina (~41.2 kDa) y subunidad β de ATP-sintasa (~27 kDa). En conclusión, esta investigación sugiere que los antígenos circulantes de T. solium excretados en orina de pacientes con NCC detectan dos proteínas específicas relacionadas a la estructura y metabolismo del parásito que podrían usarse como biomarcadores para mejorar el diagnóstico y seguimiento del tratamiento de la enfermedad.