DETENTION OF SNAKE VENOM PERUVIAN Bothrops ATROX AFFINITY COLUMN FOR OBTAINING SPECIFIC POISON

• Autores: Sandoval P., G. A., Lazo M., F., Rodríguez Q., E., Mendoza F., J., Yarlequé Ch., A.
• Formato: artículo
• Fecha de Publicación: 2011
• Institución: Universidad Nacional Mayor de San Marcos
• Repositorio: Revista UNMSM - Revista Peruana de Química e Ingeniería Química
• Lenguaje: español
• OAI Identifier: oai:ojs.csi.unmsm:article/4604
• Enlace del recurso: https://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/quim/article/view/4604
• Nivel de acceso: acceso abierto
• Materia: poison Bothrops atrox; BrCN-Sepharose 4B; antibodies; chromatography; veneno; Bothrops atrox; Sepharosa 4B-BrCN; anticuerpos; cromatografía

Has immobilized the snake venom of Bothrops atrox Peruvian to obtaining specific antibodies from the serum of immunized previously albino rabbits by affinity chromatography . Venom ( 100 mg ) was coupled to 1 g of BrCN - Sepharose 4B resin and packed into a chromatography column of 0.8 x 6.0 cm . This column was used for purification of specific antibodies from serum of New Zealand albino male rabbits ( 2 kg ) immunized with B. atrox venom . Serum ( 1 ml ) was applied to the column and protein fractions were eluted sequentially with 0.15 M NaCl , pH 6.0 buffer and 0.1 M glycine -HCl , pH 2.5 . Protein quantitation was performed by spectrophotometric methods . Immobilization of B. atrox venom gel yielded the affinity column to obtain anti- B antibodies . atrox , which were eluted with glycine -HCl buffer 0.1 M , pH 2.5 , recovering 100 mg of this antibody per mL serum. It is concluded that the use of Sepharose 4B column , BrCN yielded purified antibodies against B. atrox venom
Se ha inmovilizado el veneno de la serpiente peruana Bothrops atrox para la obtención de anticuerpos específicos a partir del suero de conejos albinos previamente inmunizados mediante cromatografía de afinidad. El veneno (100 mg) fue acoplado a 1 g de Sepharosa 4B-BrCN y la resina empaquetada en una columna cromatográfica de 0.8 x 6.0 cm. Esta columna fue utilizada para la purificación de anticuerpos específicos a partir de suero de conejos machos albinos Nueva Zelanda (2 kg) inmunizados con el veneno de B. atrox. El suero (1 mL) fue aplicado a la columna y las fracciones proteicas se eluyeron sucesivamente con NaCl 0.15 M, pH 6.0 y buffer glicina-HCl 0.1 M, pH 2.5. La cuantificación de proteínas se realizó por métodos espectrofotométricos. La inmovilización del veneno de B. atrox en el gel permitió obtener una columna de afinidad para la obtención de anticuerpos anti-B. atrox, los cuales fueron eluídas con buffer glicina-HCl 0.1 M, pH 2.5, recuperándose 100 μg de estos anticuerpos por mL de suero. Se concluye que el uso de la columna de Sepharosa 4B-BrCN permitió obtener anticuerpos purificados contra el veneno de B. atrox