Compara el porcentaje y calidad postdescongelamiento de células madre espermatogoniales (SSC) de alpaca proliferadas y no proliferadas in vitro. Para ello se emplearon biopsias testiculares de 22 animales provenientes del camal municipal de Huancavelica (aproximadamente 22 horas post mortem). Los parámetros espermáticos iniciales (movilidad y concentración) fueron evaluados en cada muestra a partir de espermatozoides epididimarios. Se obtuvieron suspensiones de células testiculares mediante digestiones enzimáticas y se evaluó la concentración y vitalidad de las células, luego, las células testiculares fueron cultivadas in vitro (FP), criopreservadas mediante un protocolo termocontrolado lento, descongeladas y proliferadas (CP), o proliferadas y luego criopreservadas (PC). La evaluación de las células fue realizada mediante citometría de flujo con marcadores específicos para...

La presente invención se refiere a un método de criopreservación de células madre espermatogoniales proliferadas y no proliferadas correspondiente a la especie Vicugna pacos mediante un proceso termocontrolado. La invención consiste en colocar células madre espermatogoniales (SSC) en un medio de criopreservación, y hacerlo pasar por un proceso termocontrolado de 4 °C a -7 °C a una tasa de 2 °C/min, luego mantener esta temperatura durante 11 minutos, y a continuación seguir congelando hasta -30 °C a una tasa de 0.3 °C/min, y por último llevar a la muestra a -84 °C a una tasa de 6 °C/min; el proceso de criopreservación sigue colocando la muestra en vapor de nitrógeno líquido por 12 horas, y finalmente sumergir en nitrógeno líquido. En cuanto a nuestro método, se logró obtener con azul de tripán una vitalidad promedio de 76.12 % en las células espermatogoniales posd...

La presente invención se refiere a un procedimiento para la preparación de un medio de criopreservación, en particular uno que es suplementado con maca para preservar tejidos en forma de fragmentos o biopsias testiculares; el cual comprende las siguientes etapas: a) Preparar un medio F10 de Ham (Ham's F10) modificado el cual en 500 ml contiene 4.9 g de Ham's F10, 0.0375 g de penicilina, 0.0375 g de estreptomicina, 0.1225 g de lactato de calcio, 2.73 g de Hepes, 0.168 g de bicarbonato de sodio, y es enrasado a 500 ml con agua ultrapura, el medio obtenido tiene pH 7.4; b) Suplementar el medio F10 de Ham modificado con 10% de dimetilsulfóxido (1.41 M) + 10 % de Suero Fetal Bovino + 200 mM de un azúcar del grupo de trehalosa o sucrosa + 20 mg/mL de extracto atomizado de Maca Negra; y c) Filtrar el medio esterilizado.

Referido a método de criopreservación de biopsia testicular que comprende: a) extraer la biopsia testicular, b) transferir a un contenedor con un medio con F10 de Ham modificado y suplementado con 10 % dimetilsulfoxido (1.41 M), suero fetal bovino, trehalosa 200 nM, extracto atomizado de maca negra 20 mg/mL, C) estabilizar la biopsia a 4° C por 1H en baño maría, d) colocarlo a un sistema de congelamiento termocontrolado de 4° C a -35° C, e) transferirlo a vapor de nitrógeno líquido por 12 H, f) sumergirlo al nitrógeno líquido. En donde los fragmentos testiculares pertenecen a Vicugna pacos.