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El diagnóstico serológico de la brucelosis se lleva a cabo por la detección de anticuerpos generados contra el liposacárido “LPS” o extractos bacterianos de células enteras por ELISA o pruebas de aglutinación. El objetivo del trabajo fue evaluar una proteína recombinante que pueda ser usada en el diagnóstico serológico de la brucelosis bovina. Se escogió el gen de la Omp31 de Brucella melitensis 16M. El gen fue clonado a partir de ADN de B. melitensis. La expresión de la proteína Omp31r se realizó en un sistema de expresión procariota utilizando el vector pET28a y la purificación por cromatografía de afinidad a metales (IMAC). Un ELISA indirecto fue estandarizado utilizando sueros controles de bovinos positivos y negativos. La proteína Omp31r reaccionó con los sueros controles positivos y logró discriminarlos frente a los sueros negativos. La sensibilidad y especif...
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The serological diagnosis of brucellosis is carried out by the detection of antibodies generated against the liposaccharide «LPS» or bacterial extracts of whole cells by ELISA or agglutination tests. The objective of this study was to evaluate a recombinant protein that can be used in the serological diagnosis of bovine brucellosis. The Omp31 gene of Brucella melitensis 16M was chosen. The gene was cloned from DNA of B. melitensis; the expression of the Omp31r protein was performed in a prokaryotic expression system using the pET28a vector and purification by metal affinity chromatography (IMAC). An indirect ELISA was standardized using control sera from positive and negative bovines. The Omp31r protein reacted with the positive control sera and succeeded in discriminating against the negative sera. The sensitivity and specificity of the ELISA assay was 77.2% and 90.6%, respectively. T...
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En el presente estudio se evaluó la respuesta inmune adquirida por vacunación contra la peste porcina clásica (PPC) en cerdas a cuatro tiempos distintos de gestación (70, 75, 80 y 90 días) empleando la vacuna Pest-Vac® (Pfizer). Se tomaron muestras de sangre 24 horas previas a la vacunación y 72 horas después del parto. Se determinó el nivel de anticuerpos mediante un ELISA de bloqueo. No se encontró diferencia significativa entre los títulos de anticuerpos generados por la vacunación según la edad de gestación ni tampoco entre las muestras prevacunales y del posparto. Sin embargo, el efecto del número de parto, utilizado como covariable, presentó diferencia significativa (p<0.05) en el porcentaje de bloqueo de anticuerpos contra PPC.
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The immune response acquired by vaccination against classical swine fever (CSF) in sows at four gestational ages (70, 75, 80 and 90 days) was evaluated using the Pest-Vac® vaccine (Pfizer). Blood samples were taken 24 hours before vaccination and 72 hours after parturition. The level of antibodies was determined by a blocking ELISA. No significant difference was found between the antibody titres generated by the vaccination according to gestational age nor between the pre-vaccination and post-partum samples. However, the effect of the number of parturitions, used as a covariate, presented a significant difference (p<0.05) in the percentage of blocking of antibodies against PPC.