Evaluation of the immunogenicity of a recombinant protein of a Pasteurella multocida isolated from alpacas with pneumonia

• Autores: Maximiliano G., Jorge, Maturrano H., Lenin, Luna E., Luis, Hurtado C., Raquel, Chero O., Ana, Rosadio A., Raúl
• Formato: artículo
• Fecha de Publicación: 2018
• Institución: Universidad Nacional Mayor de San Marcos
• Repositorio: Revista UNMSM - Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú
• Lenguaje: español
• OAI Identifier: oai:ojs.csi.unmsm:article/14197
• Enlace del recurso: https://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/veterinaria/article/view/14197
• Nivel de acceso: acceso abierto
• Materia: Pasteurella multocida; P6-like; alpaca; RT-PCR Real Time; relative quantification; RT-PCR en tiempo real; cuantificación relativa

The aim of the study was to evaluate the in vitro immunogenic activity of a recombinant P6-like protein from a culture of Pasteurella multocida isolated from pneumonia cases in young alpacas. Blood peripheral mononuclear cells (PBMCs) were challenged with a recombinant P6-like protein at a concentration of 10 ng per sample, from 3 to 72 hours. Total RNA was extracted to perform the real-time RT-PCR test to observe cytokine expression levels of the Th1 immune response (TNF-α, IFN-γ and IL-2) and Th2 (IL-10 and IL-4) in the established times. Both Th1 and Th2 profile cytokines expressed a greater number of times than PBMC not exposed to the recombinant protein, where at 24 and 48 hours showed the greater expressions. Likewise, an apparent trend toward the Th2 profile was found, but at levels that did not influence the expression of cytokines in the other profile.
El objetivo del estudio fue evaluar la actividad inmunogénica in vitro de una proteína P6-like recombinante procedente de un cultivo de Pasteurella multocida aislada de cuadros de neumonía en crías de alpacas. Se desafiaron cultivos de células mononucleares periféricas sanguíneas (PBMC) con una proteína recombinante P6-like a una concentración de 10 ng por muestra, desde las 3 hasta las 72 horas. Se extrajo ARN totales para realizar la prueba de RT-PCR en tiempo real para observar los niveles de expresión de citoquinas de la respuesta inmune Th1 (TNF-á, IFN-g e IL-2) y Th2 (IL-10 e IL-4) en los tiempos establecidos. Se encontró que tanto las citoquinas con perfil Th1 como Th2 expresan un mayor número de veces con respecto a PBMC no expuestos a la proteína recombinante, siendo las 24 y 48 horas los momentos de mayor expresión. Asimismo, se encontró una aparente tendencia hacia el perfil Th2, pero en niveles que no influyen en la expresión de citoquinas del otro perfil.