Efecto de la criopreservación en el potencial de membrana plasmática en espermatozoides de alpaca (Vicugna pacos)
Descripción del Articulo
Membrane potential is the electrical difference between the inside and outside of a cell, and depolarization is the reduction of the negative value of this potential. This study aimed to determine the state of the plasma membrane potential of alpaca spermatozoa after cryopreservation, using fluoresc...
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| Formato: | artículo |
| Fecha de Publicación: | 2024 |
| Institución: | Universidad Nacional Mayor de San Marcos |
| Repositorio: | Revistas - Universidad Nacional Mayor de San Marcos |
| Lenguaje: | español |
| OAI Identifier: | oai:revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe:article/29294 |
| Enlace del recurso: | https://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/veterinaria/article/view/29294 |
| Nivel de acceso: | acceso abierto |
| Materia: | sperm alpaca cryopreservation membrane depolarization espermatozoides criopreservación despolarización de membrana |
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Efecto de la criopreservación en el potencial de membrana plasmática en espermatozoides de alpaca (Vicugna pacos)Effect of cryopreservation on plasma membrane potential in alpaca (Vicugna pacos) spermatozoaPerez Ramos, JefrySantiani, AlexeiPerez Ramos, JefrySantiani, Alexeispermalpacacryopreservationmembrane depolarizationespermatozoidesalpacacriopreservacióndespolarización de membranaMembrane potential is the electrical difference between the inside and outside of a cell, and depolarization is the reduction of the negative value of this potential. This study aimed to determine the state of the plasma membrane potential of alpaca spermatozoa after cryopreservation, using fluorescence intensity as a measure. In total, 32 epididymal sperm samples subjected to a standard cryopreservation protocol were analysed. Each sample was evaluated before and after the process. The fluorochrome DISBAC2(3) was used at 15 µm for 30 min and 12 µM propidium iodide (PI) at 37 °C for 10 min to analyse membrane depolarization and viability, respectively. Measurements were performed with a flow cytometer containing an image analyser, using a 488 nm excitation laser and the detection channels Ch03 and Ch05 for DisBAC2(3) and PI, respectively. The mean fluorescence intensity of DisBAC2(3) in fresh live spermatozoa was 3176 ± 1398, while in thawed spermatozoa it was 2356 ± 1206 (p<0.05). Results suggest that cryopreservation, on average, reduces the fluorescence intensity of DisBAC2(3), which can be interpreted as a hyperpolarization of the plasma membrane after thawing.El potencial de membrana es la diferencia eléctrica entre el interior y exterior de una célula, y la despolarización es la reducción del valor negativo de este potencial. Este estudio buscó determinar el estado del potencial de membrana plasmática de los espermatozoides de alpaca tras la criopreservación, utilizando la intensidad de fluorescencia como medida. Se emplearon 32 muestras de espermatozoides epididimarios sometidas a un protocolo de criopreservación estándar. Cada muestra fue evaluada antes y después del proceso. Se utilizó el fluorocromo DIsBAC2(3) a 15 µm durante 30 min y Ioduro de Propidio (PI) 12 µM a 37 °C durante 10 min para analizar la despolarización de la membrana y la viabilidad, respectivamente. Las mediciones se realizaron con un citómetro de flujo que contenía un analizador de imágenes, usando un láser de excitación de 488 nm y los canales de detección Ch03 y Ch05 para DisBAC2(3) y PI, respectivamente. La intensidad media de fluorescencia de DisBAC2(3) en los espermatozoides vivos frescos fue de 3176 ± 1398, mientras que en los descongelados fue de 2356 ± 1206 (p<0.05). Los resultados sugieren que la criopreservación, en promedio, reduce la intensidad de fluorescencia de DisBAC2(3), lo que puede interpretarse como una hiperpolarización de la membrana plasmática después del descongelamiento.Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Facultad de Medicina Veterinaria2024-10-31info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionapplication/pdfhttps://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/veterinaria/article/view/2929410.15381/rivep.v35i5.29294Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú; Vol. 35 No. 5 (2024); e29294Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú; Vol. 35 Núm. 5 (2024); e292941682-34191609-9117reponame:Revistas - Universidad Nacional Mayor de San Marcosinstname:Universidad Nacional Mayor de San Marcosinstacron:UNMSMspahttps://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/veterinaria/article/view/29294/21505Derechos de autor 2024 Jefry Perez Ramos, Alexei Santianihttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0info:eu-repo/semantics/openAccessoai:revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe:article/292942024-11-01T00:31:07Z |
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Membrane potential is the electrical difference between the inside and outside of a cell, and depolarization is the reduction of the negative value of this potential. This study aimed to determine the state of the plasma membrane potential of alpaca spermatozoa after cryopreservation, using fluorescence intensity as a measure. In total, 32 epididymal sperm samples subjected to a standard cryopreservation protocol were analysed. Each sample was evaluated before and after the process. The fluorochrome DISBAC2(3) was used at 15 µm for 30 min and 12 µM propidium iodide (PI) at 37 °C for 10 min to analyse membrane depolarization and viability, respectively. Measurements were performed with a flow cytometer containing an image analyser, using a 488 nm excitation laser and the detection channels Ch03 and Ch05 for DisBAC2(3) and PI, respectively. The mean fluorescence intensity of DisBAC2(3) in fresh live spermatozoa was 3176 ± 1398, while in thawed spermatozoa it was 2356 ± 1206 (p<0.05). Results suggest that cryopreservation, on average, reduces the fluorescence intensity of DisBAC2(3), which can be interpreted as a hyperpolarization of the plasma membrane after thawing. |
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