Optimization of a protocol for cryopreservation of the spermatophore and sperm mass of the whteleg shrimp Litopenaeus vannamei (Boone, 1931)

• Autores: Dominguez Mendoza, Luz Fernanda, Torres Pera, Carlos Alberto, Salvatierra Alor, Max, Motte D., Emmerik, Quimi Mujica, Juan Gerardo, Valdivia Cuya, Martha Esther, Solis Loza, María Isabel, Rosales Maceda, Yovani Luzmila, Luzardo Solis, Juan Vicente, Mialhe M., Eric
• Formato: artículo
• Fecha de Publicación: 2020
• Institución: Universidad Nacional Mayor de San Marcos
• Repositorio: Revista UNMSM - Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú
• Lenguaje: español
• OAI Identifier: oai:ojs.csi.unmsm:article/17101
• Enlace del recurso: https://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/veterinaria/article/view/17101
• Nivel de acceso: acceso abierto
• Materia: Cryopreservation; spermatophore; sperm mass; Litopenaeus vannamei; Criopreservación; espermatóforo; masa espermática

The effect of six cryoprotective solutions based on MgCl2 and methanol, in addtion with sucrose and 10% Aloe vera gel or 10% egg yolk, on the sperm viability in spermatophore and sperm mass of Litopenaeus vannamei was evaluated. Besides, cooling rates of -0.5, -1 and -2 °C/min were used until temperature reached -35, -80 and -100 °C prior to immersion in liquid nitrogen. The sperm viability rate was determined by eosin-nigrosin staining. The results showed that the solutions based on MgCl2, sucrose plus egg yolk or Aloe vera gel better preserved sperm viability in spermatophore (82.8 ± 2.3% and 72.6 ± 3.1%) and in sperm mass (83.4 ± 2.5% and 76 ± 1.1%) without significant differences with the control group (p>0.05). The freezing curve showing less damage in spermatophore started from 25 °C and reached -35 °C with a rate of -1 °C/min using a cryoprotective solution with egg yolk and MgCl2, showing a sperm viability greater than 80% without significant differences with the control group (p>0.05), and a rate of -2 °C/min in the same temperature range for the group with sperm mass and a solution based on Aloe vera gel. In conclusion, the use of a solution based of MgCl2, sucrose, Aloe vera gel or egg yolk and at a cooling rate of -1 °C/min or -2 °C/min until reaching -35 °C allows a successful freezing of spermatophores or sperm of Litopenaeus vannamei.  
Se evaluó el efecto de seis soluciones crioprotectoras basadas en MgCl2 y metanol, acompañado de sucrosa y gel de Aloe vera al 10% o yema de huevo al 10%, sobre la viabilidad espermática en espermatóforo y masa espermática de Litopenaeus vannamei. Además, se usaron tasas de enfriamiento de -0.5, -1 y -2°C/min hasta lograr descensos de temperatura a -35, -80 y -100 °C previo a la inmersión en nitrógeno líquido. La tasa de viabilidad espermática fue determinada mediante la tinción eosina-nigrosina. Los resultados mostraron que las soluciones basadas en MgCl2, sucrosa más yema de huevo o gel de Aloe vera preservaron mejor la viabilidad espermática en espermatóforo (82.8 ± 2.3% y 72.6 ± 3.1%) y en masa espermática (83.4 ± 2.5% y 76 ± 1.1%), sin diferencias significativas con el grupo control (p>0.05). La curva de congelamiento que mostró menor daño en espermatóforo inició desde 25 °C y llegó a -35 °C con una tasa de -1 °C/min empleando una solución crioprotectora con yema de huevo y MgCl2, mostrando una viabilidad espermática mayor a 80% sin diferencias significativas con el grupo control (p>0.05), y una tasa de -2 °C/min en el mismo rango de temperaturas para el grupo con masa espermática y una solución basada en gel de Aloe vera. En conclusión, el uso de una solución compuesta por MgCl2, sucrosa, gel de Aloe vera o yema de huevo y una tasa de enfriamiento de -1°C/min o -2°C/min hasta alcanzar -35°C permite un exitoso congelamiento de espermatóforos o masa espermática de Litopenaeus vannamei.